一、服務(wù)簡(jiǎn)介
原代細(xì)胞(primary culture cell)是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學(xué)研究等,還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。原代細(xì)胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用。
原代細(xì)胞是來源于不同組織器官,胚胎及血液的新鮮樣本經(jīng)特殊實(shí)驗(yàn)方法處理而制備的原初培養(yǎng)細(xì)胞,這一過程被稱為原代細(xì)胞分離。原代細(xì)胞具有保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。
細(xì)胞的分離純化和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。我們通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。原代細(xì)胞培養(yǎng)是指將組織從動(dòng)物體內(nèi)取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機(jī)械方法剪碎處理,分散成單細(xì)胞,在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖的過程。
二、技術(shù)流程
酶消化分離法(過夜冷消化法)
①細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織,如肝、腎、甲狀腺、羊膜、胚胎組織、上皮組織等,用Hanks液清洗組織三次,剪成碎塊大小為4毫米左右。②再用Hanks液洗2-3次以除去血球和脂肪組織。③加入0.25%的胰蛋白酶,搖勻后放4℃過夜。④次日再用Hanks液洗滌,棄去上清,共洗2-3次。⑤加入少量含血清的培養(yǎng)基吹打分散,細(xì)胞計(jì)數(shù),按適當(dāng)?shù)臐舛确制颗囵B(yǎng)
非酶消化法(EDTA消化法)①把組織塊剪碎,呈1mm3大小的組織塊。②將碎組織塊在平皿中用無鈣鎂PBS洗2-3次。③加入消化液(胰蛋白酶或膠原酶或EDTA)于37℃水浴中作用適當(dāng)時(shí)間(中間可輕搖1~2次),若組織塊膨松呈絮狀可終止,若變化不大可更換一次消化液,繼續(xù)消化直至膨松絮狀為止。④棄去上清,加入含有鈣、鎂離子的培養(yǎng)基中止消化反應(yīng),并洗滌2-3次后,加入完全培養(yǎng)基。⑤用吸管吹打,使細(xì)胞充分散開后用紗網(wǎng)過濾后分瓶培養(yǎng)。
三、服務(wù)說明
1、明確告知所需種屬的某個(gè)部位細(xì)胞;
2、所需細(xì)胞量;
3、純度的要求;
4、若另有疑問歡迎向本公司咨詢,我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)。
四、成果展示
五、詢價(jià)及訂購(gòu)
感謝您選擇我公司的原代細(xì)胞分離提取服務(wù)。如有相關(guān)問題請(qǐng)聯(lián)系我們的工作人員。