一、服務(wù)簡(jiǎn)介

       細(xì)胞周期（Cell Cycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開(kāi)始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過(guò)程，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時(shí)離開(kāi)細(xì)胞周期，停止細(xì)胞分裂，執(zhí)行一定生物學(xué)功能（G0期）。  流式細(xì)胞儀的工作原理是將待測(cè)細(xì)胞放入樣品管中，在氣體的壓力下進(jìn)入充滿鞘液的流動(dòng)室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動(dòng)室的噴嘴噴出，形成細(xì)胞柱。通過(guò)對(duì)流動(dòng)液體中排列成單列的細(xì)胞進(jìn)行逐個(gè)檢測(cè)，得到該細(xì)胞的光散射和熒光指標(biāo)，分析出其體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等物理及化學(xué)特征。

      細(xì)胞內(nèi)的DNA含量隨細(xì)胞周期進(jìn)程發(fā)生周期性變化，如G0/G1期的DNA含量為2C，而G2期的DNA含量是4C。利用PI標(biāo)記的方法，通過(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞內(nèi)DNA的相對(duì)含量進(jìn)行測(cè)定，可分析細(xì)胞周期各時(shí)相的百分比。

1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，倒去培養(yǎng)液，胰酶適度消化細(xì)胞，用培養(yǎng)液吹打，800 rpm，離心 15 min去上清。

2、PBS洗2次，加0.5 mL PBS吹勻，務(wù)必吹散。

3、用5 mL注射器將細(xì)胞吸起，用力打入5 mL 70%(預(yù)冷)乙醇中，封口膜封口。4℃固定過(guò)夜（可長(zhǎng)至2周）。

4、800 rpm 15 min收集固定細(xì)胞，PBS洗2次。

5、用0.4 mL PBS重懸細(xì)胞并轉(zhuǎn)至Tube中輕輕吹打（防止細(xì)胞破碎）。

6、加RNase-A約3 μL至終濃度約為50 μg/mL ，37℃水浴消化30 min；

七、加PI約50 μL至終濃度約為65 μg/mL ，在冰浴中避光染色30 min。

八、用300目（孔徑40~50微米）尼龍網(wǎng)過(guò)濾，上機(jī)檢測(cè)。

九、樣品分析測(cè)定及打印。

1、 客戶提供：狀態(tài)良好的受試細(xì)胞；  

2、實(shí)驗(yàn)周期：1-2周；

3、明確檢測(cè)時(shí)間

4、提供流式原文件

五、詢價(jià)及訂購(gòu)

感謝您選擇我公司的流式檢測(cè)細(xì)胞周期服務(wù)。如有相關(guān)問(wèn)題請(qǐng)聯(lián)系我們的工作人員。