一、服務(wù)簡(jiǎn)介
凝膠遷移(EMSA)是一種檢測(cè)蛋白質(zhì)和DNA序列相互結(jié)合的技術(shù),最初用于研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用,可用于定性和定量分析。目前用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
蛋白質(zhì)可以與末端標(biāo)記的核酸探針結(jié)合,在瓊脂糖膠或非變性膠中電泳時(shí)這種復(fù)合物比無(wú)蛋白結(jié)合的探針在凝膠中泳動(dòng)的速度慢,即表現(xiàn)為相對(duì)滯后。該方法可用于檢測(cè)DNA結(jié)合蛋白、RNA結(jié)合蛋白,并可通過(guò)加入特異性的抗體(supershift)來(lái)檢測(cè)特定的蛋白質(zhì),進(jìn)行未知蛋白的鑒定。
二、技術(shù)流程
1、 核蛋白樣本提取與蛋白定量。
2、 生物素標(biāo)記DNA3’端并去除TdT。
3、 Super-Shift反應(yīng),配制6.5%聚丙烯酰胺凝膠,配制好各反應(yīng)體系,EMSA室溫結(jié)合反應(yīng)20min,電泳上樣。
4、 電轉(zhuǎn)膜,操作方法同常規(guī)Western blot轉(zhuǎn)膜操作。
5、 紫外交聯(lián),將核酸交聯(lián)于PVDF膜上。
6、 化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)生物素標(biāo)記的探針
三、服務(wù)說(shuō)明
1、細(xì)胞樣本:需提供至少1*10^7細(xì)胞量;
2、新鮮組織樣本:大于500mg/樣本,干冰運(yùn)輸;
3、目的基因信息、蛋白信息及待測(cè)樣本物種信息;
4、提供轉(zhuǎn)錄因子特異性抗體
5、若客戶(hù)已制備好探針、蛋白樣品可以提供
四、成果展示
五、詢(xún)價(jià)及訂購(gòu)
感謝您選擇我公司的EMSA檢測(cè)服務(wù)。如有相關(guān)問(wèn)題請(qǐng)聯(lián)系我們的工作人員。