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EMSA檢測(cè)

EMSA檢測(cè)

貨    號(hào): HS-MS009

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產(chǎn)品介紹

一、服務(wù)簡(jiǎn)介

      凝膠遷移(EMSA)是一種檢測(cè)蛋白質(zhì)和DNA序列相互結(jié)合的技術(shù),最初用于研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用,可用于定性和定量分析。目前用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

     蛋白質(zhì)可以與末端標(biāo)記的核酸探針結(jié)合,在瓊脂糖膠或非變性膠中電泳時(shí)這種復(fù)合物比無(wú)蛋白結(jié)合的探針在凝膠中泳動(dòng)的速度慢,即表現(xiàn)為相對(duì)滯后。該方法可用于檢測(cè)DNA結(jié)合蛋白、RNA結(jié)合蛋白,并可通過(guò)加入特異性的抗體(supershift)來(lái)檢測(cè)特定的蛋白質(zhì),進(jìn)行未知蛋白的鑒定。


二、技術(shù)流程

 1、 核蛋白樣本提取與蛋白定量。

 2、 生物素標(biāo)記DNA3’端并去除TdT。

 3、 Super-Shift反應(yīng),配制6.5%聚丙烯酰胺凝膠,配制好各反應(yīng)體系,EMSA室溫結(jié)合反應(yīng)20min,電泳上樣。

 4、 電轉(zhuǎn)膜,操作方法同常規(guī)Western blot轉(zhuǎn)膜操作。

 5、 紫外交聯(lián),將核酸交聯(lián)于PVDF膜上。

 6、 化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)生物素標(biāo)記的探針  


三、服務(wù)說(shuō)明 

1、細(xì)胞樣本:需提供至少1*10^7細(xì)胞量;

2、新鮮組織樣本:大于500mg/樣本,干冰運(yùn)輸;

3、目的基因信息、蛋白信息及待測(cè)樣本物種信息;

4、提供轉(zhuǎn)錄因子特異性抗體

5、若客戶(hù)已制備好探針、蛋白樣品可以提供


四、成果展示



五、詢(xún)價(jià)及訂購(gòu)

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