一、服務(wù)簡(jiǎn)介

      Luciferase報(bào)告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報(bào)告系統(tǒng)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過(guò)程中，會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence)，并可通過(guò)熒光測(cè)定儀設(shè)備對(duì)luciferin氧化過(guò)程中釋放的生物熒光進(jìn)行檢測(cè)，常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。

      轉(zhuǎn)錄因子是一種具有特殊結(jié)構(gòu)、行使調(diào)控基因表達(dá)功能的蛋白質(zhì)分子，也稱(chēng)為反式作用因子。某些轉(zhuǎn)錄因子僅與其靶啟動(dòng)子中的特異序列結(jié)合，這些特異性的序列被稱(chēng)為順式作用元件，轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合域和順式作用元件實(shí)現(xiàn)共價(jià)結(jié)合，從而對(duì)基因的表達(dá)起抑制或增強(qiáng)的作用。熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)（luciferase assay）是檢測(cè)這類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子和其靶啟動(dòng)子中的特異順序結(jié)合的重要手段。

二、技術(shù)流程

  1、合成或擴(kuò)增目的片段并亞克隆至目標(biāo)熒光素酶報(bào)告基因載體；

  2、構(gòu)建轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)載體或合成相應(yīng)mimicsl，均設(shè)置相應(yīng)對(duì)照；

  3、培養(yǎng)目的細(xì)胞并接種于孔板中，將報(bào)告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)?；蛳鄳?yīng)mimics共轉(zhuǎn)染細(xì)胞。

  4、熒光素酶檢測(cè)熒光強(qiáng)度，并與空載對(duì)照比較；

  5、分析數(shù)據(jù)并整理完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告

三、 服務(wù)說(shuō)明

  1、啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控：提供轉(zhuǎn)錄因子名稱(chēng)及ID、靶基因名稱(chēng)及ID；

  2、miRNA靶基因驗(yàn)證：提供miRNA名稱(chēng)、物種信息、靶基因名稱(chēng)及ID；

  3、待測(cè)目的細(xì)胞，如無(wú)特殊要求默認(rèn)使用293T細(xì)胞；

  4、如有基因模板或構(gòu)建好的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)載體，可以提供

  5、可按客戶(hù)要求提供構(gòu)建好的載體；

四、成果展示

五、詢(xún)價(jià)及訂購(gòu)

感謝您選擇我公司的熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)服務(wù)。如有相關(guān)問(wèn)題請(qǐng)聯(lián)系我們的工作人員。